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羅氏蛋白酶抑制劑&磷酸酶抑制劑

cOmplete 是多種蛋白酶抑制劑的混合片劑：為水溶性片劑；同時(shí)持續(xù)抑制絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶及金屬蛋白酶等在內(nèi)的多種蛋白酶；可用于所有的組織及細(xì)胞，如動(dòng)物、植物、酵母、細(xì)菌或真菌。

PhosSTOP 保護(hù)蛋白質(zhì)不發(fā)生去磷酸化反應(yīng)；可以抑制多種磷酸（酯）酶；適用于在細(xì)胞裂解過(guò)程中保護(hù)蛋白質(zhì)，并且可以適用于多種不同來(lái)源的樣品（哺乳動(dòng)物，植物，酵母）；可以結(jié)合cOmplete Lysis Kits 和 cOmplete Protease Inhibitor Cocktail Tablets一起使用；這種抑制劑藥片可用于緩沖福爾馬林（福爾馬林固定術(shù)）。

• 許多生物學(xué)過(guò)程和通路的調(diào)節(jié)都伴隨著磷酸酯的形成和去除；而蛋白的磷酸化狀態(tài)的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶相互影響達(dá)到的。為了了解這些通道，大量的研究工作正在制藥公司和研究院所開展。其中一個(gè)重要的步驟就是準(zhǔn)確的觀察一般和特異的磷酸化狀態(tài)，而這就需要對(duì)磷酸化狀態(tài)的有效保護(hù)。 羅氏（Roche）公司推出的磷酸酶抑制劑混片劑正是解決這一實(shí)驗(yàn)難題。
• 磷酸化的蛋白可以被非特異性的磷酸酶（例如：堿性磷酸酶），特異性的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶、酪氨酸蛋白磷酸酶或雙重特異性磷酸酶去磷酸化。這里，我們就一種新的磷酸酶抑制劑混合片的性能做一介紹，稱之為PhosSTOP。PhosSTOP是一種即用型的片劑，其中的一些磷酸酶抑制劑只需要納摩爾級(jí)的量。無(wú)需花費(fèi)漫長(zhǎng)的時(shí)間尋找合適的磷酸酶，也不必繁瑣的稱量和混合。PhosSTOP可同時(shí)持續(xù)抑制包括酸性和堿性磷酸酶，及絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶（PP1, PP2A, PP2B）和酪氨酸蛋白磷酸酶在內(nèi)的多種磷酸酶。
• 一片PhosSTOP可以溶解在10ml的緩沖液中。PhosSTOP具有*的溶解性，如果需要，可以將2－3片PhosSTOP也可溶解在同樣體積的緩沖液中；相反，也同樣也可以選用小體積的緩沖液。溶解后的儲(chǔ)存液體4℃可以穩(wěn)定保存一個(gè)月以上，－20℃下可以保存6個(gè)月。
• 磷酸酶無(wú)處不在；依賴于不同的物種、細(xì)胞或組織類型、實(shí)驗(yàn)中使用的特異的細(xì)胞狀態(tài)，磷酸酶的種類和數(shù)量都會(huì)有差異。雖然每種磷酸酶都表現(xiàn)出不同的底物特異性，依賴不同的物種，幾種分離磷酸酶用以測(cè)試抑制效果的范圍。
• PhosSTOP可應(yīng)用于多種細(xì)胞提取物中磷酸酶的抑制作用，對(duì)酸性和堿性磷酸酶，絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶（PP1, PP2A, PP2B）和酪氨酸蛋白磷酸酶的抑制作用見表2。
• 磷酸酶活性的檢測(cè)通過(guò)western blots實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，例如，絲氨酸磷酸酶特異性抗體（圖2）。
• PhosSTOP片劑可與含有福爾馬林的緩沖液配合兼容使用；適用于福爾馬林固定樣本，保持組織切片中蛋白的磷酸化狀態(tài)。
• PhosSTOP片劑蛋白分離過(guò)程中有效保護(hù)蛋白，不會(huì)影響后繼的蛋白檢測(cè)（例如：western blot）或是蛋白濃度檢測(cè) (例如：BCA或是Bradford)。